Asociación de mayores niveles de RANKL y linfocitos T CD4+ en periodontitis / Increased levels of Rank L and T CD4+ lymphocytes in periodontitis

Propósito: infiltrado celular mononuclear donde el 70 lo constituyen los linfocitos de tipo T, con la capacidad de secretar una serie de citoquinas que participan en los eventos patogénicos de la enfermedad, regulando la inflamación de los tejidos periodontales y la destrucción del hueso alveolar. El objetivo del presente estudio es determinar si en la periodontitis crónica se observan mayores niveles de RANKL y si estos se encuentran asociados a los linfocitos T CD4+ reclutados en los sitios con enfermedad periodontal. Material y Método: En 20 individuos con periodontitis crónica y en 12 individuos controles voluntarios y periodontalmente sanos se determinaron los niveles de mRNA de RANKL mediante RT-PCR tiempo real, se aislaron células gingivales totales para inmunotipificar y cuantificar los leucocitos infiltrantes gingivales y los linfocitos T CD4+ y CD8+ a través de citometría de flujo, en sobrenadantes de cultivos celulares, sin estimular y estimulados con LPS, PHA, extracto bacteriano de e inter-leuquinas 2 y 15, se detectaron los niveles de RANKL mediante ELISA, y se determinó la expresión de RANKL, de células T CD4+ y se colocalizó inmunoreacción positiva para RANKL en linfocitos CD4+ mediante inmunohistoquímica.

Estudio de la funcionalidad de las células NK en el embarazo / Functionality study of pregnancy NK cells

En los últimos años, la participación del sistema inmune innato en el desarrollo de la pre-eclampsia ha sido el objetivo de numerosos estudios. Sin embargo, el rol de las células agresoras naturales (NK) en esta patología no ha sido totalmente aclarado. Las células NK, componentes del sistema inmune innato, poseen actividad citotóxica espontánea, y secretan citoquinas tales como interferón gamma (INF-y ) y Factor de Necrosis Tumoral alfa (TNF-alfa). En el presente estudio hemos analizado la actividad funcional y el inmunofenotipo de células NK obtenidas desde sangre periférica de pacientes con pre-eclampsia, mujeres sanas embarazadas y mujeres sanas no embarazadas. Se cuantificó la actividad cititóxica usando el ensayo de liberación de51cromo. La producción de citoquinas en respuesta a activadores policlonales y el inmunofenotipo (CD3-CD16+CD56+) fueron determinados por citometría de flujo. Estos parámetros no evidenciaron diferencias significativas entre los grupos estudiados; sin embargo, en las pacientes con pre-eclampsia se observa una tendencia hacia una menor citotoxicidad y menor producción de TNF-alfa en células NK estimulada sin vitro, y una proporción aumentada del subtipo celular NK CD56-CD16+ en sangre periférica en relación con los otros dos grupos estudiados.

NK cells functionality during pregnancy. During the last few years, the role of innate immune system in development of pre-eclampsia has been the focus of a number of studies. However, the role of natural killer (NK) cells in pregnancy and pre-eclampsia has not been totally clarified. NK cells, an important component of innate immune system, normally exhibit spontaneus cytolytic activity and secrete cytokines such as interferon gamma (IFN-y) and tumor necrosis factor alpha (TNF-alpha). In current paper, we studied functional activity and immunophenotype of peripheral blood NKcells obtained from patients with pre-eclampsia, healthy pregnant women and non-pregnant healthy women. For this purpose, we quantified cytolytic activity using 51chromium release assay. We determined cytokine production in response to polyclonal activators and cells immunophenotype (CD3-CD16+CD56+) by flow cytometry. We found no significant differences in these parameters among the three groups studied, however, in patients with pre-eclampsia, there is a tendency to a decreased cytotoxic activity and less production of TNF-alpha by NK cells in vitro as well as an increased proportion of the NK subset CD56-CD16+, in peripheral blood.

Efecto de la reexpansión pulmonar en la actividad de la gama glutamil transpeptidasa en el lavado broncoalveolar / Effect of lung reexpansion of gamma-glutamyl transpeptidase activity in broncho alveolar lavage

Se exploró la actividad de gama-glutamil transpeptidasa (GGT) en el lavado broncoalveolar (LBA) como posible indicador de daño tisular en la reexpansión pulmonar de un neumotórax experimental unilateral. Seis conejos adultos sedados con Ketamina y Acetilpromazina, se sometieron a neumotórax inyectando 20 ml de N2/kg en el espacio pleural derecho. Diariamente se repuso el N2 reabsorvido y al tercer día se reexpandió el pulmón aplicando -100 mm de Hg durante 2 h. Se extrajo y separó los pulmones y se practicó LBA con 9 ml de NaCl 0,9% /g x 5 veces a 4 grados Celcius. Previo recuento celular total el LBA se centrifugó 2 veces a 140 g por 10 minutos determinándose proteínas totales y actividad de GGT en el "pellet". Se encontró un aumento significativo tanto de células (p = 0,02) como de proteínas (p < 0,02) y de la actividad de GGT (p < 0,007) en el LBA del pulmón reexpandido comparado con el pulmón contralateral (prueba "t" de student para muestras pareadas). La actividad de GGT se correlacionó lineal r = 0,8 y significativamente p < 0,005; análisis de varianza) con el contenido de proteínas del LBA. Los resultados sugieren que el aumento de GGT en el LBA sería un indicador del daño pulmonar difuso provocado por la reexpansión